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1.《饲料法规文件汇编()》
为更好地方便饲料行业管理者、基层饲料执法人员和从业者学习了解使用饲料法规*策,运用好国家法规*策,为行业提供便利的公共服务,中国农业科学院饲料研究所组织有关专家,对现行有效的法规、规章、规范性文件、技术标准和*策性文件等进行整理,形成《饲料法规文件汇编()》。
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2.《饲料管理法律法规问》
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3.年“动物性食品质量与安全”专题征稿函
以下解答由青岛蔚蓝生物渊源有自共享实验室郭吉原老师提供。
Q:关于鱼粉中挥发性盐基氮测定方法技术问题的探讨
A:
三、TVB-N检测过程设计考量
(一)TVB-N检测的对象
鱼粉中的氨、铵盐、可溶性胺,它们溶于水,遇碱分解,遇酸稳定。
(二)提取的方法
1.采用水提取
氨、铵、胺(部分)可溶于水。同时鱼粉的其他可溶性成分如游离的氨基酸、可溶性蛋白、盐等也会溶解在水中,考虑到鱼粉生产工艺中烘干工序会造成蛋白变性,可溶性蛋白氨基酸会很低。因此,水提取方法可行。
2.采用酸(如三氯乙酸溶液)提取
被测对象溶解在酸中,但是由于三氯乙酸是强酸,Ka=0.12,10%三氯乙酸的pH值在1以下,在如此强的酸溶液中,鱼粉会水解,产生游离的氨基酸和氨,会干扰检测,造成结果偏高。因此,三氯乙酸提取的方法不可取。
3.采用碱提取
会造成被测定成分分解,此方法也不可行。
4.采用有机溶剂提取
氨、铵、胺在有机溶剂中溶解度低,提取不充分,此方法也不可行。
结论:提出方法采用水提取,条件为室温、振荡。
(三)提取液的净化
提取液蒸馏前要采用必要的净化措施,分离出固体不溶性蛋白质,防止高温时过量的碱(氢氧化镁)与蛋白质反应。
提取液净化的方法是对提取液过滤或高速离心,取滤液或离心上清液进行蒸馏操作。
(四)蒸馏过程加碱的选择
提取液中的氨、铵、胺必须加入一定量的碱才能游离出来,被水蒸气带出,最后被硼酸吸收。在此步骤中碱的选择是关键,选择强碱如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙(石粉水)溶液,被测对象与氢氧化钠等反应,产生挥发性的氨与胺。但是,蒸馏时在高温强碱作用下,提取液中溶解的蛋白质氨基酸也会与强碱反应,造成蛋白质氨基酸分解产生氨,造成检测结果偏高,影响测定结果,因此不可采用强碱蒸馏。只能采用弱碱进行蒸馏,选择的原则是:碱性弱到不会造成蛋白质氨基酸水解,只能与氨、胺和铵反应,在碳酸钠、碳酸氢钠、硼砂、氢氧化镁(氧化镁水溶液)常见的弱碱中,氢氧化镁是最好的选择。
(五)氢氧化镁的配制
由于氢氧化镁不稳定,没有商品化的试剂销售,使用时采用氧化镁的水溶液代替氧化镁,通常配成10g/L水溶液,使用前摇动一下,加入其悬浊液。不宜直接加入氧化镁固体,这样操作容易造成氧化镁固与水蒸气一起流入吸收管路中,污染流出液,严重时堵塞蒸馏管道,造成清洗十分困难。
(六)蒸馏终点的控制
蒸馏终点是指流出液中没有氨等碱性物质,它的代表特征是pH值由碱性变为中性,因此检查是否到蒸馏终点,是检查流出液的pH是否到达7,到达则为蒸馏终点,否则,要继续蒸馏直至达到pH7的终点。经常做此实验的化验员根据经验,通过蒸馏时间或流出液体积,就可以判断蒸馏终点,这些依靠经验总结出来的,不是蒸馏终点的标准。依据蒸馏时间或流出液体积判断蒸馏终点,受到采用的蒸馏设备体积、加热功率、管路长短、实验室环境影响,不能把某个实验室某台设备得出的经验当作标准写入检测方法标准中。
(七)吸收与滴定
蒸馏出来的含氨胺类物质液体,被硼酸吸收,形成硼酸铵,硼酸铵容易分解,因此硼酸吸收液要尽快滴定。吸收完毕后马上用盐酸标准滴定溶液滴定,指示剂为甲基红溴甲酚绿混合溶液,溶液由蓝绿色变成红色为终点。
(待续)
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