高效液相色谱(HPLC)用于有机物的定量。
样品要求
可根据实际样品提供具体的样品前处理方案。
固体:5-10mg,液体5-10ml
结果示例
乙二醇含量测试
18种氨基酸含量测试
常见问题及解答
1.测试高效液相为什么需要先和测试经理沟通?
HPLC可选因素太多,检测器条件,色谱柱条件,流动相条件都可以改变出峰时间。
2.测试为什么需要标准品?
无论是定性还是定量都需要用标准品来鉴别,作为标准来衡量。
3.没有任何信息可以做HPLC吗?
可以的,这就是涉及了方法开发,耗时会久一点。
高效液相质谱(LCMS)
样品要求
液体1ml以上,固体5mg以上
结果展示
多种多酚含量组成测定
18种单糖组成测试
常见问题及解答
LC-MS样品如何预处理?
1.样品中不得含有强酸、强碱,如含有上述物质,需进行处理,以保证批pH值在2~7.5之间。样品中不得含有硼氢化钠,对于加入甲醇后会产生强碱的体系(如有氢钠)的样品请务必在送样前进行处理。2.如果体系中含有大量的无机盐,需要进行处理,以防止无机盐析出,堵塞分析柱。同时大量的无机盐存在会污染质谱离子源部分,甚至影响样品的信号。3.如果反应体系中使用了一些质谱信号响应十分强的物质,如:三乙胺,四丁基溴化铵,三苯基氧磷等,送样前请进行处理,尽量减少此类物质在样品中的残留,以避免造成目标物质质谱信号的抑制。4.对于应用了金属类催化剂(如钯类催化剂)的反应体系时,请务必进行处理后再送样。这类金属催化剂往往很容易在LCMS分析体系内残留,质谱信号非常强,将严重影响后面样品的正常测试。5.测试样品中要尽量避免含有紫外吸收比较强的溶剂,如:苯,甲苯,吡啶等。6.对于监控反应的样品(如反应液或用乙酸乙酯,二氯,三氯萃取后的反应液,过柱用烷烃溶剂等)取适量后用甲醇,乙腈等稀释到适当浓度。7.发货或纯度测定的样品尽可能的用色谱级的甲醇,乙腈,水溶解;如果这些溶剂的溶解性不好,可用较好溶的溶剂先溶解后再用色谱甲醇,乙腈稀释到合适的浓度;另外,有些发货的样品需要用nm,可用DMSO或DMF溶样(发货样品尽量避免含有乙酸乙酯,二氯等溶剂),然后再用色谱甲醇,乙腈稀释到合适的浓度,因为这两个溶剂的峰保留时间短,不会与样品峰重叠。发货样品送固体的请注明所需溶剂。8.被测样品或样品中含有剧*物质或刺激性气味,请注意,实验员务必要标示清楚并告知分析员,以便采取防护措施。9.样品必须经过0.22um的过滤器过滤(过滤后样品必须澄清,无絮状物),否则不予测试。
送样量及样品处理有什么要求吗?
1.对于已经纯化的样品,最好去除溶剂,用点样毛细管沾取少量放入样品管,并稀释至0.5mL,用0.22μm的滤器过滤即可。2.对于反应体系样品,如果在薄层上点一下,斑点即很清晰,说明浓度适中,取0.2mL放入样品样管,稀释至0.5mL,用0.22μm的滤器过滤即可。3.如果需要点多次才能在薄层上见到,就需要酌情增加。4.样品浓度特别小或特别大的请及时向分析员说明。反应液需用2ml离心管,切忌使用其它离心管或样品管。要选择能完全溶解样品的溶剂,稀释处理后的样品需要澄清。浓度过小或过大要备注说明。
如何判断样品是不是可以做LCMS
可以查询相关文献,或者样品相关的检测信息,一般的化合物,代谢产物,降解产物都是可以测试的。
数据如何解析
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LCMS可以进行定量实验吗?
可以的,需要标准品。LCMS定量比一般的检测要灵敏。
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