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版《中国药典》微生物新标准新要求与技术操作规范化、菌种确认、控制菌鉴定及检验技术能力全面提升”实操班
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写在前面
说起实验室基础操作,可能你会觉着这有什么难,整天做实验谁不会呢?但是天天进行的操作是正确的吗?有没有我们以为是正确的但是实际上是错误呢?跟小编一起看看这些基础的不能再基础的实验室知识吧!
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实验室常用的基本操作
玻璃仪器的基本操作
1、玻璃仪器的洗涤
(1)震荡水洗
(2)内壁附有不易洗掉的物质,可用毛刷刷洗
倒废液——注入一半水——选好毛刷,确定手拿部位刷洗——如是反复
(3)刷洗后,再用水连续振荡数次,必要时还应用蒸馏水淋洗三次洗净状态下,水均匀分布不挂水珠(如左图所示);未洗净状态下,器壁挂着水珠(如右图所示)。
玻璃仪器里如附有不溶于水的碱、碳酸盐、碱性氧化物等可先加盐酸溶解,再用水冲洗;附有油脂等污物可先用热的纯碱液洗,然后用毛刷刷洗,也可用毛刷蘸少量洗衣粉刷洗;对于口小、管细的仪器,不便用刷子洗,可用少量王水或重铬酸盐洗液涮洗;用以上方法清洗不掉的污物可用较多王水或洗液浸泡,然后用水涮洗。(1)不要未倒废液就注水(2)不要几支试管一起刷)
2、仪器的干燥
(1)晾干(左图)与烤干(右图)
(2)吹干(左图)与烘干(右图)
(3)气流烘干(左图)与快干(右图)
3、常见玻璃仪器的使用
(1)量筒与量杯
(2)移液管
移液管使用注意事项:
应根据不同的需要选用大小合适的移液管,如取1.5ml的溶液,显然选用2ml移液管要比选用5ml移液管误差小;
吸取溶液时要把移液管插入溶液,避免吸入空气而将溶液从上端溢出;
移液管从液体中移出后必须用滤纸将管的外壁擦干,再行放液;
不可用移液管直接从瓶中移取溶剂或溶液,剩余溶剂或溶液不可倒回贮液瓶,应作废弃物处理。
(3)滴定管
操作步骤:
洗涤——涂凡士林——检漏——装入操作液——滴定管排气——滴定操作
(4)容量瓶
容量瓶使用前应检查容量瓶的瓶塞是否漏水,合格的瓶塞应系在瓶颈上,不得任意更换。容量瓶刻度以上的内壁挂有水珠会影响准确度,所以应该洗得很干净。称量的任何固体物质必须先在小烧杯中溶解或加热溶解,冷却至室温后才能转移到容量瓶中。容量瓶绝不应加热或烘干。容量瓶定容完再翻转摇匀,若翻转摇匀后定容,会因加的水或溶剂过多,导致溶液浓度偏小。
天平的基本操作
1、天平室规章制度
(1)操作者工作时穿好工作服,班前班后整理好岗位卫生,保持天平、操作台、地面及门窗洁净。
(2)操作者应熟悉分析天平的原理、构造和正确的使用方法,避免因使用不当和保管不妥而影响称量准确度或损伤天平某些部件。
(3)所用分析天平,每年由市计量部门定期校正计量一次。任何人不得随意拆装其部件或改变其灵敏度。
(4)与本室无关人员不得随便入内,更不得随意操作使用天平。
2、托盘天平
用于精密度要求不高的称量。所附砝码是天平上称量时衡定物质质量的标准。
使用注意事项:
(1)称量前天平要放平稳,游码放在刻度尺的零处,调节天平左右的平衡螺母,使天平平衡。
(2)称量时把称量物放在左盘,砝码放在右盘。砝码要用镊子夹取,先加质量大的砝码,再加质量小的砝码。
(3)称量干燥的固体药品应放在纸上称量。
(4)易潮解、有腐蚀性的药品(如氢氧化钠),必须放在玻璃器皿里称量。称量完毕后,应把砝码放回砝码盒中,把游码移回零处。
3、电子分析天平
用于精密度要求高的称量使用电子分析天平。被称物重量不得超过天平最最大载荷。若被称物较重,应先在粗天平上试称。
使用注意事项:
(1)每次称量前检查天平位置是否水平,零点偏差多少。
(2)天平机构有任何损坏或不正常情况时,在未消除故障以前应停止使用。
(3)被称物的温度必须和天平室的室温一致。
(4)被称物须盛在干净的容器中称量,具有腐蚀性的蒸气或吸湿性的物质必须放在密闭的容器内称量。
(5)被称物要放在天平盘的中央。
(6)天平的前门不得随意打开。称量过程中只能打开左右两个边门。
(7)使用完毕后清洁天平,断开电源,再用罩把天平罩好,必须登记使用情况后方可离开天平室。
药品的取用和溶液的配制
1、固体试剂的取用规则
(1)要用干净的药勺取用。用过的药勺必须洗净和擦干后才能再使用,以免沾污试剂。
(2)取用试剂后立即盖紧瓶盖。
(3)称量固体试剂时,必须注意不要取多,取多的药品,不能倒回原瓶。
2、液体试剂的取用规则
(1)从滴瓶中取液体试剂时,要用滴瓶中的滴管,滴管绝不能伸入所用的容器中,以免接触器壁而沾污药品。从试剂瓶中取少量液体试剂时,则需要专用滴管。装有药品的滴管不得横置或滴管口向上斜放,以免液体滴入滴管的胶皮帽中。
(2)使用胶头滴管“四不能”:不能伸入和接触容器内壁,不能平放和倒拿,不能随意放置,未清洗的滴管不能吸取别的试剂。
(3)配制一定物质的量溶液时,溶解或稀释后溶液应冷却再移入容量瓶。
(4)配制一定物质的量浓度溶液,要引流时,玻璃棒的上面不能靠在容量瓶口,而下端则应靠在容量瓶刻度线下的内壁上(即下靠上不靠,下端靠线下)。
(5)容量瓶不能长期存放溶液,更不能作为反应容器,也不能互用。(一般用于配制标准溶液的容量瓶最好专用)
3、溶液的配制
(1)配制溶质质量分数一定的溶液
计算:算出所需溶质和水的质量。把水的质量换算成体积。如溶质是液体时,要算出液体的体积。
称量:用天平称取固体溶质的质量;用量筒量取所需液体、水的体积。
溶解:将固体或液体溶质倒入烧杯里,加入所需的水,用玻璃棒搅拌使溶质完全溶解。
(2)配制一定物质的量浓度的溶液
计算:算出固体溶质的质量或液体溶质的体积。
称量:用托盘天平称取固体溶质质量,用量筒量取所需液体溶质的体积。
溶解:将固体或液体溶质倒入烧杯中,加入适量的蒸馏水用玻璃棒搅拌使之溶解,冷却到室温后,将溶液引流注入容量瓶里。
转移:用适量蒸馏水将烧杯及玻璃棒洗涤2-3次,将洗涤液注入容量瓶,振荡,使溶液混合均匀。
定容:继续往容量瓶中小心地加水,直到液面接近刻度2-3cm处,改用胶头滴管加水,使溶液凹面最低处恰好与刻度相切。把容量瓶盖紧,再振荡摇匀。
4、溶液配制的注意事项
(1)分析实验所用的溶液应用GB中规定的三级水配制,容器应用纯化水洗涤三次。特殊要求的溶液应事先作空白值检验。
(2)溶液要用带塞的试剂瓶盛装,见光易分解的溶液要装于棕色瓶中,挥发性试剂瓶塞要严密,见空气易变质及放出腐蚀性气体的溶液也要盖紧,必要时用蜡封住。浓碱液应用塑料瓶盛装。
(3)每瓶试剂必须有标明名称、规格、浓度和配制日期的标签。
(4)配制硫酸、磷酸、硝酸、盐酸等溶液,都必须将酸倒入水中。配制时不可在试剂瓶中进行配制。
(5)用有机溶剂配制溶液时,有时有机物溶解较慢,应不时搅拌,可以在热水浴中温热搅拌,不可直接加热,必须避免火源。
(6)不可用手接触带腐蚀性或剧*的溶液。剧*废液必须经解*处理,不可直接倒入下水道
(7)一般溶液保存时间不可超过6个月,如果试剂发生浑浊变质,就必须废弃不得使用。
5、溶液储存时可能的变质原因
(1)玻璃与水和试剂作用后多少会被侵蚀(特别是碱性溶液),使溶液中含有钠、钙、硅酸盐等杂质。某些离子容易被吸附于玻璃表面,这对于低浓度的离子标准液更不可忽视。故低1mg/ml的离子溶液不适合长期保存。
(2)由于试剂瓶密封不好,空气中的二氧化碳、氧气、氨或酸雾侵入使溶液发生变质。
(3)某些溶液见光分解(硝酸银、汞盐),有些溶液放置时间长了会水解(铋盐、锑盐),有些溶液会受微生物的分解。
(4)含有易挥发的组分,使其浓度降低。
实验室常用基本操作技术
1、重量分析操作技术
(1)过滤
过滤是利用滤纸、滤膜或滤器将溶液中的固态物质(悬浮物和沉淀等)进行有效分离的分析操作。
常用的仪器:漏斗、滤纸和滤膜等。
滤纸的选择:定量滤纸(无灰滤纸,≤0.08mg)
漏斗的选择:
颈长为15~20cm;锥体角度应为60°;颈的直径一般应为3~5mm;颈口处磨成45°角;滤纸的上缘应低于漏斗上沿0.5~1cm
滤纸的折叠:四折法,三层一边外层撕下一角备用
滤纸的安放:三层的一边放在漏斗出口短的一边,做水柱
(2)干燥
干燥是指除去样品,沉淀或试剂中所含水分或溶剂过程,常用烘烤,冷冻,化学和吸附等方法。必须根据被干燥物质的物理性质,热稳定性以及与水结合的形式选择干燥方法。
常用的干燥剂和干燥设备
干燥剂:无水氯化钙、无水硫酸钠、无水硫酸钙、浓硫酸、硅胶、活性炭
干燥设备:电烘箱、红外干燥箱、热浴
温度:一般都℃~℃之间
称量
称量是重量法的关键,在确定了天平精度的条件下,提高分析准确的关键是选择合格的称样量和使用正确的称量方法。
称样量的选择:选择适宜的称样量是保证重量分析的重要条件之一,例如一般分析天平的称量误差为0.2mg(万分之一天平),或者0.02mg(十万分之一天平),为使称量相对误差小于0.1%,必须有适当的称样量。
分光光度分析操作技术
分光光度法是基于物质分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。按物质吸收光的波长不同,分光光度法可分为可见分光光度法、紫外分光光度法及红外分光光度法(又称红外光谱法)。
分光光度法主要用于测量样品中1%~0.%有效量成分,其特点:灵敏度高,准确定好,使用范围广,几乎所有的无机离子和有机化合物都可以采用此方法。
1、紫外-可见分光光度计
2、参比溶液的选择
实验室常用安全操作
一切劳动工作以人为本。保证化验人员的安全与健康、防止污染环境、保证化验室工作安全而有效的进行是化验室管理工作的重要内容。化验室安全包括防火、防爆、防*、防腐蚀、电气安全和防止污染环境等方面。
1、防止中*、化学灼伤与割伤
一切药品和试剂要有与其内容物相符的标签。
严禁试剂入口以及用鼻子直接接近瓶口进行鉴别。鉴别时应将试剂瓶远离鼻子,用手轻轻煽动,稍闻即止。
取用带腐蚀性的药品,如强酸、强碱、浓氨水、冰乙酸等,建议戴上防护手套。拿比较重的瓶子时,应一手托住底部,一手拿住瓶口。
处理有*有害的气体、有挥发性的药品及有*有机试剂时(如氮氧化物、溴、氯、硫化物、汞、砷化物等),应在通风橱内进行。
溶解氢氧化钠、氢氧化钾等药品时,因其会大量放热,故必须用耐热容器处理。浓酸浓碱必须在各自稀释后再中和。
2、防火、防爆
操作易燃物时必须远离火源,瓶塞打不开时,切忌用火加热或用力敲打。倾倒易燃液体时还必须谨防静电。
加热可燃易燃物时,必须在水浴或者严密的电热板上缓慢进行,严禁用明火或电炉加热。
蒸馏液体时,如果需要补充液体时,应先等其冷却后再补充。蒸馏易燃物时应先通水再通电加热。
烘箱、电炉周围严禁放有易燃物或带挥发性的易燃液体。
3、灭火
发生火灾时不得大呼小叫、到处乱跑,应及时灭火。发生大规模火灾时,首先应快速从安全通道离开失火场所,安全后拨打,不可单独冲入火灾现场灭火。发生局部火灾时,应立即切断电源,选择使用合适的灭火器灭火。身上的衣物着火时不可跑动。应迅速脱去衣物,或在地上打滚扑灭。灭火器不可对人脸。
4、常用有*有害化学物质的处理
无机酸类:将废酸慢慢倒入过量的含碳酸钠或氢氧化钙的水溶液中或用废碱相互中和。中和后用大量水冲洗。
氢氧化钠、氨水:用盐酸水溶液中和后,再用大量水冲洗。
含氰废液:加入氢氧化钠使pH大于10,加入过量的3%的高锰酸钾溶液,使CN-氧化分解。
含氟废液:加入石灰使生成氟化钙沉淀。
5、常见化学试剂中*应急处理
二硫化碳中*的应急处理方法:
吞食时,给患者洗胃或用催吐剂催吐。将患者躺下并加保暖,保持通风良好。
有机磷中*的应急处理方法:
使患者确保呼吸道畅通,并进行人工呼吸。万一吞食时,用催吐剂催吐,或用自来水洗胃等方法将其除去。沾在皮肤、头发或指甲等地方的有机磷,要彻底把它洗去。
三硝基甲苯中*的应急处理方法:
沾到皮肤时,用肥皂和水,尽量把它彻底洗去。若吞食时,可进行洗胃或用催吐剂吐,将其大部份排除之后,才服泻药。
苯胺中*的应急处理方法:
如果苯胺沾到皮肤时,用肥皂和水把其洗擦除净。若吞食时,用催吐剂、洗胃及服泻药等方法把它除去。
氯代烃中*的应急处理方法:
把患者转移,远离药品处,并使其躺下保暖。若吞食时,用自来水充分洗胃,然后饮服于毫升水中溶解30克硫酸钠制成的溶液。不要喝咖啡之类兴奋剂。吸入氯仿时,把患者的头降低,使其伸出舌头,以确保呼吸道畅通。
草酸中*的应急处理方法:
立刻饮服下列溶液,使其生成草酸钙沉淀:
1.在毫升水中,溶解30克丁酸钙或其它钙盐制成的溶液。
2.大量牛奶,可饮食用牛奶打溶的蛋白作镇痛剂。
乙醛、丙酮中*的应急处理方法:
用洗胃或服催吐剂等方法,除去吞食的药品。随后服下泻药。呼吸困难时要输氧。丙酮不会引起严重中*。
强酸(致命剂量1毫升)
吞服时立刻饮服毫升氧化镁悬浮液,或者氢氧化铝凝胶、牛奶及水等东西,迅速把*物稀释。然后至少再食10多个打溶的蛋作缓和剂。因碳酸钠或碳酸氢钠会产生二氧化碳气体,故不要使用。
进入眼睛时撑开眼睑,用水洗涤15分钟。
沾着皮肤时用大量水冲洗15分钟。如果立刻进行中和,因会产生中和热,而有进一步扩大伤害的危险。因此,经充分水洗后再用碳酸氢钠之类稀碱液或肥皂液进行洗涤。但是当沾着草酸时,若用碳酸氢钠中和,因为由碱而产生很强的刺激物,故不宜使用。也可以用镁盐和钙盐中和。
甲醛中*的应急处理方法:
吞食时,立刻饮食大量牛奶,接着用洗胃或催吐等方法,使吞食的甲醛排出体外,然后服下泻药。有可能的话,可服用1%的碳酸铵水溶液。
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03月25-28日
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广州
03月25-27日
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杭州
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03月29-31日
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南京
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杭州
04月22-25日
版《中国药典》微生物相关新标准新要求与技术操作规范化、菌种确认、控制菌鉴定及检验技术能力全面提升实操班
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